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尿素琼脂培养基基础
更新时间:2016-06-01   点击次数:897次

用途:

   用于鉴别肠道菌尿素酶试验 (GB4789.4-2010,《中华人民共和国药典》2010年版,SN0170-92和GB13091-91,ISO标准)。

原理:

   蛋白胨提供碳源和氮源;氯化钠维持均衡的渗透压;磷酸二氢钾是缓冲剂;具有尿素酶的细菌分解培养基中的尿素,产生大量的氨,使培养呈碱性,酚红指示剂在pH6.8时呈黄色,pH8.1呈粉红色;琼脂是培养基的凝固剂。

配方(每升):

  蛋白胨 1g

  氯化钠 5g

  葡萄糖 1g

  磷酸二氢钾 2g

  酚红 0.012g

  琼脂 12g

  zui终pH7.2±0.2

 使用方法:

  1、 称取本品21g,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至*溶解,分装三角瓶,121℃高压灭菌15min,待冷却至50—55℃,每200mL培养基加入经过滤除菌的20%的尿素溶液20mL或5支(029100)40%的尿素溶液共10mL,尿素的zui终浓度为2%。分装无菌试管,制成斜面。

  2、 挑取待检菌的新鲜纯培养物,浓密地涂布在尿素琼脂斜面上,置36±1℃培养24h。

  3、 于2—4h及24h各观察一次结果。培养基呈现红色时为阳性反应,颜色不变者为阴性反应。如为阴性可继续培养观察至4d。

质量控制:

 质控菌株接种后于36±1℃培养24h结果如下 :

 菌    名          菌    号      生长状况         培养特征

 普通变形杆菌        HK7131         良好         培养基变红色

 大肠埃希氏菌       ATCC25922       良好         培养基不变色

  贮    存:贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。

  规    格:250g

 

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